TISION DE GRAM: La tinción de Gram. es muy importante dentro del laboratorio de microbiología, en cuanto a la aplicación práctica es muy necesario en el trabajo con el microscopio.Método de identificación de bacterias mediante una tinción específica. Desarrollado por el médico danés Hans Christian Joachim Gram, es un procedimiento utilizado universalmente. En un primer momento las bacterias se tiñen con violeta de genciana y después se tratan con la solución de Gram (1 parte de yodo, 2 partes de yoduro potásico y 300 partes de agua); por último se lavan con alcohol etílico, y unas bacterias retienen el fuerte color azul de la violeta de genciana y otras se decoloran por completo. A veces se añade una contratinción con fucsina o eosina para teñir las bacterias decoloradas de color rojo y hacerlas más visibles.Se denominan bacterias Gram positivas a aquellas que retienen la tinción azul y bacterias Gram negativas a las que quedan decoloradas. Algunas bacterias presentan capacidad variable de tinción de Gram y se llaman Gram variables. Bacterias Gram positivas típicas son los estafilococos que producen forúnculos; Gram negativas representativas son la Escherichia coli de la flora intestinal o los bacilos de la tos ferina; Gram variables son los bacilos de Koch de la tuberculosis.Clásicamente los reactivos utilizados para la realización de la tinción de Gram han sido el cristal violeta como colorante inicial, la solución de lugol para acomplejar a éste, el alcohol o acetona para la decoloración y la safranina o fucsina básica como contracolorante. Existen una serie de puntos con respecto a un buen control de calidad de las tinciones de Gram, y que deben ser tenidas en cuenta antes de su realización, a saber:· Diariamente se debe comprobar que no existen precipitados ni cristales en la solución de cristal violeta. Si los hay, filtrar antes de su uso. · La estabilidad de la solución de cristal violeta, alcohol y/o acetona, safranina o fucsina básica es de 1 año y la de la solución de lugol de 6 meses, todas ellas conservadas en frascos cerrados (la evaporación puede alterar su efectividad) a temperatura l laboratorio es útil como test para un rápidoambiente.· Cada nuevo lote, aunque lo recomendable sería diariamente, preparar tinciones con cepas de colección de E.coli, S.aureus o S.epidermidis para comprobar los resultados esperados.· Ciertos procedimientos de laboratorio pueden dificultar la interpretación microscópica de la tinción, como son la preparación de extensiones demasiado gruesas, uso de portas que no han sido prelavados o desengrasados, sobrecalentamiento en la fijación y excesivos lavados durante la tinción. Todos los anteriores son causas comunes de pobres resultados en la tinción de Gram.· Debe tenerse en cuenta que no todos los microorganismos observados en una tinción pueden ser cultivados, y al contrario, algunos no observados pero presentes consiguen ser recuperados en el cultivo.· Supervisión diaria de unas cuantas tinciones elegidas al azar por personal especializado, para confirmación de coincidencias y posibles discrepancias.Estas son las funciones y usos que se deben cumplir para los analisis de muestras clínicas:1-identificar la bacteria que causa la infección2-aislamiento bacteriano3-la importancia de la buena calidad de la muestra biológica para el estudio, para así valorar con esto el número de células inflamatorias, así como el de las células epiteliales.Con la tinción de gram podemos distinguir varias diferencias: los cocos de forma esférica, los bacilos de forma alargada, los espirales, si son de forma rígida, blandas, estirados o curvados, entonces se les llama vibriones.La técnica de la coloración de gram en resumen es:Recoger muestra estéril, hacer el extendido en espiral, dejar secar a temperatura ambiente,fijar la muestra al calor ,agregar cristal violeta al y esperar 1 minuto. Este tinte dejará de color morado las bacterias Gram positivas, enjuagar con agua corriente, agregar lugol y esperar 1 minuto, enjuagar con agua corriente, agregar alcohol y acetona por goteo y esperar 15 segundos, enjuagar con agua, agregar safranina y esperar 30 segundos. Este tinte dejará de color rosado las bacterias Gram negativas, enjuagar con agua, Chorro suave ya sea con piseta o directo de la llave, para observar al microscopio óptico es conveniente hacerlo a 100x con aceite de inmersión.BIBLIOGRAFIA: Tinción de Gram," Enciclopedia Microsoft® Encarta® Online 2009http://es.encarta.msn.com © 1997-2009 Microsoft Corporation. Tomado el: 16/09/2009
“Enciclopedia Temática Amphora” siglo XXI SAN MARTÍN DOMINGUEZ EDITORES 2000.

ultraestructura celular
ULTRA ESTRUCTURA CELULARQUE ES MICROBIOLOGIA?Ciencia que trata de los seres vivos muy pequeños: aquellos cuyo tamaño se encuentra por debajo del poder resolutivo del ojo humano: los microbiosMICROORGANISMOS:Conjunto de formas de vida agrupados por conveniencia del hombre, todos los organismos que no se pueden ver a simple vista. Este grupo es muy heterogéneo no pertenecen al mismo reino.Como funcionan (fisiología)Reproducción (dinámica)CIENCIA:· Objeto de estudio· Paradigmas· verdades· historia· modelo de coherencia.JENNER: Descubrió que la viruela se transmitía por medio del estiércol de la vaca, e invento la vacuna contra ella.Virchow, famoso patólogo alemán fue un contrincante de Pasteur ya que este tenía la teoría de que las enfermedades eran causadas por microbios. A Virchow esto no le parecía correcto. También porfiaba con Metchnikov sobre su teoría acerca de la migración de leucocitos. Metchnikov había observado como las células linfáticas, se acercaban a un objeto extraño y lo lisaban o fagocitaban por esto se le ocurrió que eran básicas en las funciones inmunitarias, Virchow negaba esto aduciendo que la inmunidad era un fenómeno humoral. Hoy se sabe que los dos tenían razón. Koch luego de ardua labor descubrió el bacilo causante de la tuberculosis, lo logro reproducir en cultivos asilados y luego reproducir la enfermedad en animales de laboratorio. Con esta información rigurosamente asentada hizo la presentación en sociedad de su descubrimiento, esto fue demasiado para Virchow considerado uno de los genios de su época que según algunas fuentes dejo la medicina y se dedico a la arqueología.LA MORFOLOGIAEn biología. Se refiere al estudio de las formas externas e internas y de la estructura de los seres orgánicos, sus transformaciones y las causas y leyes que las determinan.Demostró que las bacterias no andaban solas y llamaron a las que se agrupaban estreptococo. Las bacterias viven en colonias que aunque son independientes cada una actúan en grupoPROTEINAS: moléculas son aminoácidos, que cumple una función específica.LA MEMBRANA CELULAR: tiene una característica básica, tiene una vicapa lipidica, los lípidos tienen una cabeza hidrofobica, y cola hidrofilica.MEMBRANA CELULAR: 1. da la forma a la célula,2. es un medio selectivo (portera),3. es emisora de señales,4. recepción de señales altamente codificadas.5. Es productora de señales químicasPRIMERA GENERACION: abre porosSEGUNDA GENERACION: para la respiraciónTERCERA GENERACION: interrumpe el ciclo celularCUARTA GENERACION: interrumpe la función de las proteínas.RIBOSOMA: Los ribosomas se presentan como cuerpos esféricos o elípticos, sin membrana limitante. Son gránulos compuestos por ARN ribosoma y proteínas.Cada ribosoma está constituido por dos subunidades, llamadas mayores y menor. El tamaño de las subunidades se establece, en general, en función de la velocidad con la cual sedimentan en un campo centrífugo. La unidad que expresa esa velocidad es el Svedberg, y depende no sólo del tamaño de la partícula sino también de su forma y densidad, y del medio en que está suspendida.MITOCONDRIA:Libera energía, presentan diversa morfología, pero por lo general son aproximadamente cilíndricas u ovoides; hay también esféricas y en forma de Y. Su tamaño también es variable, pero habitualmente presentan un solo tamaño.La mitocondria es un organelo limitado por dos membranas: una externa, lisa, separada por un espacio o cámara externa de la membrana interna, plagada hacia adentro formando proyecciones llamadas crestas. La membrana interna con sus crestas delimita una cámara interna ocupada por la matriz mitocondria.APARATO DE GOLGISe presenta como un apilamiento de sacos aplanados, con bordes dilatados, y vesículas y vacuolas ubicadas cerca de esos bordes. Todas estas estructuras están compuestas por membranasEn células vegetales, hay numerosas estructuras separadas y dispersas en el citoplasma, que equivalen al aparato de Golgi, y que reciben el nombre de dictiosomas.RETICULO ENDOPLASMATICO: Se presenta como una serie de casos o bolsas aplanadas y túbulos membranosos, cuya localización y extensión es variable, y depende de la actividad metabólica particular de la célula.UNA BACTERIA ES: una célula con metabolismo completoLOS VIRUS: Los virus son parásitos intracelulares submicroscópicos, compuestos por ARN o por ácido desoxirribonucleico (ADN) —nunca ambos— y una capa protectora de proteína o de proteína combinada con componentes lipídicos o glúcidos. En general, el ácido nucleico es una molécula única de hélice simple o doble; sin embargo, ciertos virus tienen el material genético segmentado en dos o más partes.BIBILIOGRAFIA:
www.hsa.es/org/dmedica/centrales/ap/.../biomol/ -
Biologia8ed. Claude A, Villee. Mexico 1996